Embryo culture/ভ্রুণ পোষণ
Types of Embryo Culture:
Embryo Culture 5 প্রকারের হয়:
(1) Culture of mature and intact seed Embryo:
কতিপয় বীজ সুপ্তাবস্থার জন্য অঙ্কুরিত হতে পারে না। ঐ ক্ষেত্রে একটি সুস্থ সবল বীজের ভ্রুণকে টিস্যু কালচারের মাধ্যমে একটি পূর্ণাঙ্গ চারাগাছের রূপ দেওয়া হয়।
(2) Culture of immature embryo:
কিছু উদ্ভিদে বীজ তৈরী কালে বীজপত্র তৈরীর অনেক আগেই ভ্রুণ পরিস্ফুটিত হয়, এই রকমের ভ্রুণকে proembryo বলে।
Proembryo বা আদিভ্রুণ বিশিষ্ট বীজের অঙ্কুরোদগম হয় না , তাই এ রকমের উদ্ভিদের অপরিণত বীজ থেকে অপরিণত ভ্রুণকে টিস্যু কালচারের মাধ্যমে পুর্ণাঙ্গ চারাগাছের রূপ দেওয়া হয়।
(3) Culture of adventive embryos from proembryonic seeds:
Citrus জাতীয় বীজ polyembryo বিশিষ্ট হয় ও এই ভ্রুণগুলি nucellar tissue থেকে তৈরী হয় ও এরা adventive প্রকৃতির হয়।
এই adventive embryo গুলিকে tissue culture এর মাধ্যমে পুর্ণাঙ্গ চারাগাছের রূপ দেওয়া হয়।
(4) Culture of intact seed containing undifferentiated embryo:
Orchid এর বীজে একগুচ্ছ embryonic tissue থাকে মা radicle , plumule ও storage tissue তে পরিস্ফুটিত হতে পারেনি ।এই রকমের অপরিস্ফুটিত ভ্রুণকে tissue culture দ্বারা একটি পূর্ণাঙ্গ চারাগাছের রূপ দেওয়া হয়।
(5) Culture of non-viable or abortive embryo:
Interspecific বা intergeneric breeding পরীক্ষা দ্বারা তৈরী ভ্রুণের অকাল ক্ষলন ঘটে বা বীজ তৈরী হলেও বীজের অঙ্কুরোদগম হয় না, এই রকমের inviable embryo কে tissue culture দ্বারা একটি পূর্ণাঙ্গ চারাগাছের রূপ দেওয়া হয়।
Embryo culture process:
Capsella এর বীজের ভ্রুণকে কি করে পোষণ করতে হয় তার বর্ণনা দেয়া হল:
(১) প্রথমে Laminar air flowতে বীজ গুলিকে ৫-১০ মিনিট ধরে ০.১০% HgCl² দ্রবণে রেখে surface sterilization করা হয় ।
(২) এরপর sterile water দিয়ে বীজ গুলিকে বারবার ভাল করে ধুয়ে নিতে হয়।
(৩) পরে একটি dissecting microscope এর 90X objective এর নিচে একটি depression slide এ কয়েক ফোটা তরল মাধ্যমে রেখে বীজের অমরা কেটে ক্যাপসুলের বাইরের প্রাচীর বাদ দিয়ে স্টেরিলাইজ করা ফোর্সেপ দিয়ে চেপে ovule বের করা হয়।
(৪) পরের ধাপে একটি ভোঁতা সূচ দিয়ে খোঁচা দিয়ে ডিম্বক থেকে ভ্রুণ বের করা হয়।
(৫) ভ্রুণগুলিকে মাইক্রোপিপেট দিয়ে ১০ সেমি পেট্রিডিসে , প্রতি ডিসে ৬-৮টি, পোষণ মাধ্যমে স্থানান্তর করা হয়।
এইক্ষেত্রে MS ,B5 বা White এর মাধ্যম ব্যবহার করা হয়।
(৬) এরপর ২৫°C এ ১৬ ঘন্টা ফ্লোরোসেন্ট আলোতে রাখা হয়। ৪ সপ্তাহ পরে সাবকালচার করা হয়।
Comments
Post a Comment