What is Ti plasmid? Describe Agrobacterium mediated gene transfer process .

    চিত্র: Ti plasmid

 Ti plasmid এর সম্পূর্ণ নাম Tumour-inducing plasmid । Agrobacterium tumefacirns নামক একটি gm - rod shaped ব্যাক্টেরিয়াতে এই plasmid টি আছে , যার T-DNA ব্যাকটেরিয়া থেকে পোষক  দ্বিবীজপত্রী উদ্ভিদের DNAতে মিলে গিয়ে ঐ গাছে crown gall রোগ তৈরী করে।

Agrobacterium mediated gene transfer:

চিত্র: Genetically modified plant তৈরী পদ্ধতি

(১) Co-cultivation: একটি পেট্রিডিসে ব্যাক্টেরিয়া নিয়ে তাতে তামাক পাতার ডিস্ক কয়েক ঘন্টা থেকে ৩--৪ দিন রাখা হয়।

  ফলে Agrobacterium  পাতার কোষের প্রবেশ করে ও T-DNA পাতার কোষের DNA তে ঢুকে যায়।

(২)এরপর ডিস্ক গুলো কে মাধ্যম থেকে সরিয়ে carbenicillin বা cefotaxime অ্যন্টিবায়োটিক দ্রবণে দিয়ে ধুয়ে ব্যাক্টেরিয়া গুলো কে মেরে ফেলা হয়।

(৩) পরে ডিস্ক বা এক্সপ্লান্ট গুলো কে ফিল্টার পেপারে তুলে একটি পেট্রিডিসে ধাত্রীকোষ সমূহের উপর রাখা হয়।

   কঠিন পোষণ মাধ্যমে Auxin ও cytokinin এর অনুপাত 0.1mg/l:1mg/l হয়, ফলে ২-৪সপ্তাহের মধ্যে ডিস্ক গুলো তে বিটপ তৈরী হয়।

(৪) এর পরে বিটপ গুলো কে মূল তৈরীর জন্য cytokininএর চেয়ে বেশি Auxin বিশিষ্ট মাধ্যমে ৩-৪ সপ্তাহের জন্য রাখা হয়।

(৫) Hardening: অবশেষে নতুন চারাগাছ গুলো কে মাটিতে স্থানান্তর করে Hardening করা হয়।

  অপত্য গাছের প্রতি কোষের cry gene এর উপস্থিতি র জন্য cry protein তৈরী হয় ও অপত্য গুলো এ'ভাবে genetically modifiedহয়ে যায় ।

  উল্লেখ্য যে, প্রথমে ব্যাসিলাস থুরিনসেনসিস  এর cry gene কে Agrobacterium tumefacience এর disarmed করা Ti plasmid এ রিক্ম্বিন্যান্ট করিয়ে নিতে হয়।

Demerits: Agrobacterium  কখনোই একবীজপত্রী উদ্ভিদের কোষের প্রবেশ করে না, এটি dicotyledon specific bacteria।